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本品為粉末狀Glasgow's MEM (GMEM)培養基,含2.0 mM L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,含酚紅指示劑,不含丙酮酸鈉,不含HEPES,使用時需額外添加碳酸氫鈉。
本產品常溫運輸,2-8℃乾燥處避光保存,效期三年。
使用方法
配製前準備工作
1. 準備與終體積接近的潔淨容器。
2. 準備常溫(15-30℃)蒸餾水或細胞以注射用水(建議G4701)。
3. 準備1 N NaOH和1 N HCl。
用乾粉配製溶液步驟:
1. 向準備好的潔淨容器中註入95%終體積的蒸餾水,取本產品1瓶(可配製1 L培養基)或依比例稱取粉末,投入水中溶解。注意,粉末在水中崩解後即可迅速溶解,如高速攪拌可能會使粉末成團,表面形成水膜,反而不利於溶解。因此,粉末投入水中後無需高速攪拌。
2. 待粉末溶解澄清後,依2.75 g/L用量加入碳酸氫鈉,攪拌溶解。如需配製其他體積,依對應體積加入相應用量的碳酸氫鈉。
3. 以1 N NaOH和1 N HCl調整pH至低於工作pH 0.2-0.3單位(建議工作pH 6.7 -7. 1 )。溶液在過濾後pH會上升0.1-0.3單位。
4. 加水定容至終體積。過濾前應保持溶液密封。
5. 使用0.2 μm膜正壓過濾到無菌容器中備用(注意無菌操作)。
6. 過濾結束可取少許液體進行無菌檢查,待合格後使用。配製好的液體培養基2-8℃保存,保存期限1年。
Components | Concentration (mg/L) | Concentration ( mM ) |
Amino Acids | ||
L-Arginine hydrochloride | 42 | 0.19905214 |
L-Cystine 2HCl | 31 | 0.09904154 |
L-Glutamine | 292 | 2 |
L-Histidine hydrochloride-H2O | 21 | 0.1 |
L-Isoleucine | 52 | 0.39694658 |
L-Leucine | 52 | 0.39694658 |
L-Lysine hydrochloride | 73 | 0.3989071 |
L-Methionine | 15 | 0.10067114 |
L-Phenylalanine | 33 | 0.2 |
L-Threonine | 47.6 | 0.39999998 |
L-Tryptophan | 8 | 0.039215688 |
L-Tyrosine disodium salt dihydrate | 52 | 0.19923371 |
L-Valine | 46.8 | 0.4 |
Vitamins | ||
Choline chloride | 2 | 0.014285714 |
D-Calcium pantothenate | 2 | 0.004192872 |
Folic Acid | 2 | 0.004535148 |
Niacinamide | 2 | 0.016393442 |
Pyridoxal hydrochloride | 2 | 0.009803922 |
Riboflavin | 0.2 | 5.32E-04 |
Thiamine hydrochloride | 2 | 0.005934718 |
i-Inositol | 3.6 | 0.02 |
Inorganic Salts | ||
Calcium Chloride (CaCl 2 ) (anhyd.) | 200 | 1.8018018 |
Ferric Nitrate (Fe(NO 3 ) 3 9H 2 O) | 0.1 | 2.48E-04 |
Magnesium Sulfate (MgSO 4 ) (anhyd.) | 97.67 | 0.8139166 |
Potassium Chloride (KCl) | 400 | 5.3333335 |
Sodium Bicarbonate (NaHCO 3 ) | — | — |
Sodium Chloride (NaCl) | 6400 | 110.344826 |
Monosodium Phosphate(NaH 2 PO 4 ) | 108 | 0.89855075 |
Other Components | ||
D-Glucose (Dextrose) | 4500 | 25 |
Phenol Red | 15 | 0.039851222 |
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