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本品為粉末狀DMEM高糖培養基,含4 mM L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,含1 mM丙酮酸鈉,含酚紅指示劑,不含HEPES,使用時需額外添加碳酸氫鈉。
本產品常溫運輸,2-8℃乾燥處避光保存,效期三年。
使用方法
l 配製前準備工作
1. 準備與終體積接近的潔淨容器。
2. 準備常溫(15-30℃)蒸餾水或細胞以注射用水(建議G4701)。
3. 準備1 N NaOH和1 N HCl。
l 用乾粉配製溶液步驟:
1. 向準備好的潔淨容器中註入95%終體積的蒸餾水,取本產品1瓶(可配製1 L培養基)或依比例稱取粉末,投入水中溶解。注意,粉末在水中崩解後即可迅速溶解,如高速攪拌可能會使粉末成團,表面形成水膜,反而不利於溶解。因此,粉末投入水中後無需高速攪拌。
2. 待粉末溶解澄清後,依3.7g/L用量添加碳酸氫鈉,攪拌溶解。如需配製其他體積,依對應體積加入相應用量的碳酸氫鈉。
3. 以1 N NaOH和1 N HCl調整pH至低於工作pH 0.2-0.3單位(建議工作pH 7.0-7.4)。溶液在過濾後pH會上升0.1-0.3單位。
4. 加水定容至終體積。過濾前應保持溶液密封。
5. 使用0.2μm膜正壓過濾到無菌容器中備用(注意無菌操作)。
6. 過濾結束可取少許液體進行無菌檢查,待合格後使用。配製好的液體培養基2-8℃保存,保存期限1年。
Components |
Concentration |
Components |
Concentration |
|||
mg/L |
mM |
mg/L |
mM |
|||
Amino acids |
Inorganic salts |
|||||
Glycine |
30 |
0.4 |
Calcium Chloride (CaCl2) (anhyd.) |
200 |
1.80 |
|
L-Arginine hydrochloride |
84 |
0.4 |
Ferric nitrate nonahydrate ( Fe(NO3)3•9H2O) |
0.1 |
0.0002 |
|
L-Cystine dihydrochloride |
62.6 |
0.2 |
Magnesium Sulfate (MgSO4) (anhyd.) |
97.67 |
0.80 |
|
L-Histidine hydrochloride-H2O |
42 |
0.2 |
Potassium Chloride (KCl) |
400 |
5.36 |
|
L-Isoleucine |
105 |
0.8 |
Sodium Bicarbonate (NaHCO3) |
3700 |
44.04 |
|
L-Leucine |
105 |
0.80 |
Sodium Chloride (NaCl) |
4750 |
81.2 |
|
L-Lysine hydrochloride |
146 |
0.8 |
Sodium Phosphate monobasic (NaH2PO4)(anhyd.) |
108.7 |
0.906 |
|
L-Methionine |
30 |
0.2 |
Other components |
|||
L-Phenylalanine |
66 |
0.4 |
D-Glucose (Dextrose) |
4500 |
24.98 |
|
L-Serine |
42 |
0.4 |
Sodium pyruvate |
110 |
1.0 |
|
L-Threonine |
95 |
0.8 |
HEPES |
5958 |
25 |
|
L-Tryptophan |
16 |
0.08 |
Phenol Red |
14.95 |
0.0422 |
|
L-Tyrosine disodium salt dihydrate |
103.79 |
0.4 |
||||
L-Valine |
94 |
0.8 |
||||
L-Alanyl-L-Glutamine |
868.9 |
4.0 |
||||
Vitamins |
||||||
Choline chloride |
4.0 |
0.0286 |
||||
D-Calcium pantothenate |
4.0 |
0.0084 |
||||
Folic Acid |
4.0 |
0.0091 |
||||
Niacinamide |
4.0 |
0.0328 |
||||
Pyridoxine hydrochloride |
4.0 |
0.0195 |
||||
Riboflavin |
0.4 |
0.0011 |
||||
Thiamine hydrochloride |
4.0 |
0.0119 |
||||
i-Inositol |
7.2 |
0.0389 |
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