產品介紹

CCK-8 的主要成分是 WST-8（2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt），可用於檢測細胞存活率分析。 WST-8 是一種水溶性的四唑鹽，與傳統的 MTT 相比，更容易生成水溶性的反應產物。能與細胞產生酶促反應，活細胞內的粒腺體酶系統（主要是 NAD(P)H 相關的脫氫酶）會將 WST-8 還原。還原作用發生在電子傳遞鏈中，只有活細胞才能進行反應，生成一種橙黃色的 formazan 產物，再利用吸光值的不同分析出細胞存活率的多寡。不同於 MTT 的 formazan 會沉澱於細胞內，WST-8 的反應產物是水溶性的，直接溶解在培養基中，無需再溶解步驟。細胞可進行後續的加藥處理。

實驗步驟

1. 將100ul細胞懸浮液接種於96孔板，放入細胞培養箱（37℃，5%CO2）中培養。
2. 將細胞從培養箱取出，將1/10體積的細胞計數試劑盒-8（CCK-8）直接加入
培養基。輕輕敲擊板的外側，充分混合以獲得均勻的溶液
多次，同時避免氣泡。對於 96 孔板，每 100 ul 添加 10 ul 細胞計數試劑盒-8（CCK-8）
培養基。
3. 在細胞培養箱中以 37°C 的溫度培養 1 至 4 小時，直到顏色變成橘色。過度孵化
會產生錯誤的結果。
4. 將96孔板放在搖床上約1分鐘，然後讀取千分尺讀數，確保
孔板顏色均勻。
5.用酶標儀讀取450nm光吸收值，計算細胞活性。
6. 選購：直接將 10 ul 1%SDS（用 PBS 緩衝液溶解 0.1 g SOS，配製 10 ml 溶液）加入
100 ul細胞停止反應。 3天內可以讀取訊號，而不影響吸光度值。

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